Expression Et Caract risation de la Lipoxygenase Recombinante D Olive

Les lipoxyg nases (LOXs, EC 1.13.11.12) sont des dioxyg nases qui catalysent l'oxydation des acides gras polyinsatur s. Plusieurs isoformes v g tales ont t caract ris es mais leur r le physiologique reste peu connu. Dans le but d' claircir le r le de la LOX chez l'olive, un ADNc codant pour une de ses isoformes a t clon . Cet ADNc montre de forts pourcentages d'identit avec d'autres LOXs v g tales. L'enzyme recombinante, pr sente une double sp cificit , elle produit des 9- et des 13-hydroperoxydes dans un rapport 2:1. Bien que l'activit LOX soit d tect e tous les stades de maturation du fruit, la 9/13-LOX est uniquement exprim e dans les stades noirs. Sans exclure son r le dans l' laboration de l'ar me, ces r sultats sugg rent que la 9/13-LOX est probablement associ e aux ph nom nes de maturation et de s nescence des fruits. Afin d'augmenter le rendement de la 9/13-LOX d'olive recombinante, l'accessibilit du substrat son site actif a t facilit e par mutagen se dirig e. Les mutants, pr sentent un taux de conversion de l'acide linol ique jusqu' 4 fois sup rieur celui de l'enzyme native et ont des param tres cin tiques similaires la LOX1 de soja commercialis e.